超声造影与血清蛋白质谱对肝细胞癌微波消融后复发转移的研究.pdf

目的 探讨肝细胞癌超声造影表现与微波消融后复发转移的关系，筛选与肝细胞癌复发转移相关的血清差异蛋白质，寻求可能早期、无创且有效预测肝细胞癌微波消融治疗后复发转移的超声造影与血清蛋白质谱相结合的预测模型。 资料与方法 本研究中所有患者均符合以下入组条件：经穿刺活检病理证实的肝细胞癌患者，病灶数目为单发，病灶最大直径≦5cm，无血管侵犯及肝外转移，肝功能Child—Pugh分级A～B级，无严重心、脑、肾、血管等疾病。 (1) 超声造影研究组：对2006年3月～2007年11月行微波消融的65例肝细胞癌患者进行前瞻性研究，微波消融治疗前均行超声造影检查，绘制时间—强度曲线，对复发组与未复发组进行单因素及多因素分析，筛选出与肝细胞癌复发转移有关的超声造影参数。 (2) 血清蛋白质谱研究组：搜集56例肝细胞癌患者微波消融治疗前及治疗后的血清，采用CM10芯片为检测介质，经SELDI—TOF—MS测定得到蛋白质谱，通过Ciphergen ProteinChip Software标化，采用Biomarker Wizard软件比较复发组和未复发组间血清蛋白质差异，利用Biomarker Pattens Software建立决策树模型并进行盲法验证。对复发组与未复发组微波治疗前后的血清蛋白质丰度差值进行多因素分析，寻找与肝细胞癌微波消融治疗后复发转移相关血清蛋白质谱参数。 (3) 对同时参加超声造影和蛋白质谱研究的50例患者的资料进行分析，将肝细胞癌微波消融后复发转移相关的超声造影指标与血清蛋白质谱参数相结合，建立预测肝细胞癌微波消融后复发转移的人工神经网络模型。 结果 (1) 在本组研究病例中，肝细胞癌微波消融治疗后复发组和未复发组的性别构成、年龄、病毒感染类型、术前AFP水平及肿瘤分化程度均无统计学差 异。 (2) 在复发组与未复发组肝细胞癌患者治疗前超声造影参数中，单因素分析结果显示两组病灶时间—强度曲线在肝实质达峰时间(p TTP)、肿瘤与肝实质达峰时间差值(t—p TTP)以及肿瘤与肝实质峰值强度差值(t—p PI)三个参数上均具有显著性差异。多因素进一步分析结果显示，t—p TTP与t—p PI是肝细胞癌微波消融后复发转移的危险因素。 (3) 微波消融治疗前复发组与未复组患者血清中发现7个蛋白峰有显著差异。M/Z为5170和7688的蛋白峰在复发组中呈高表达，而M/Z为1103、6449、6646、6858、7787的蛋白峰在复发组中呈低表达。40例肝癌微波消融治疗前患者的血清蛋白质谱建立的复发转移决策树判断模型，由M/Z为6858、1103的2个蛋白峰组成，其灵敏性为96.30％，特异性为76.92％，对16例肝癌微波消融治疗前患者血清蛋白质谱进行盲法验证，该模型盲法验证的灵敏性为50％，特异性为75％。 (4) 微波消融治疗后复发组与未复组患者血清中发现26个蛋白峰有显著差异。M/Z为4426、6207、7161、9670、10028、12150、12222、24006、28928、29021、29233的蛋白峰在复发组中呈高表达，而M/Z为3943、4100、4299、4657、5077、5348、6446、6644、6855、7788、7992、8586、8708、8794、19966的蛋白峰在复发组中呈低表达。40例肝癌微波消融治疗后患者的血清蛋白质谱建立的复发转移决策树判断模型，由M/Z为4100、4657的2个蛋白峰组成，其灵敏性为92.59％，特异性为84.62％。对16例肝癌微波消融治疗后患者血清蛋白质谱进行盲法验证，该模型盲法验证的灵敏性为62.5％，特异性为75％。 (5) Logistic回归分析结果显示，M/Z为28700、20628、10868、2140、17300、2067的蛋白峰先后进入回归方程。方程与实际资料的一致率达到95.8％。其中，M/Z为2140和17300的蛋白峰丰度差值是肝细胞癌微波消融后复发转移的保护因素；而M/Z为2067、10868、20628、28700的蛋白峰丰度差值是肝细胞癌微波消融后复发转移的危险因素。 (6) 超声造影与血清蛋白质谱相结合建立的人工神经网络模型与实际数据吻合性良好，训练组的分类正确率达到100％；并且对肝细胞癌患者微波 消融后复发情况具有较好的预测作用，预测组的分类正确率是83.3％，其中复发组的分类正确率是87.5％，未复发组的分类正确率是80％。 结论 (1) 肿瘤与肝实质达峰时间差值(t—p TTP)、肿瘤与肝实质峰值强度差值(t—p PI)两个参数是复发转移的危险因素，有望成为微波消融治疗后复发转移的超声造影预测指标。 (2) 由CM10芯片筛选出的微波消融治疗术前及术后血清差异蛋白峰可能与肝癌术后复发转移有关；决策树模型对肝细胞癌患者微波消融治疗的预后具有一定的预测作用。 (3) 由M/Z为28700、20628、10868、2140、17300、2067的蛋白峰丰度差值建立的回归方程能够比较好地反映肝细胞癌患者微波消融治疗的预后情况。 (4) 超声造影与血清蛋白质谱相结合建立的人工神经网络模型对肝细胞癌患者微波消融后复发转移情况具有较好的预测作用。 关键词 肝细胞癌 微波消融 转移 复发 超声造影 蛋白质芯片 表面加强激光解吸电离—飞行时间—质谱